कोविड-19 साठी निदान चाचण्या: वर्तमान पद्धती, पद्धती आणि भविष्याचे मूल्यमापन

तज्ज्ञांच्या आंतरराष्ट्रीय संस्थांच्या सल्ल्यानुसार सध्या व्यवहारात असलेल्या COVID-19 च्या निदानासाठी प्रयोगशाळा चाचण्यांचे पुनरावलोकन आणि मूल्यमापन केले जाते.

कोविड -१. आजारचीनच्या वुहानमध्ये उद्भवलेल्या या रोगाने आतापर्यंत २०८ हून अधिक देशांना प्रभावित केले आहे. संपूर्ण जगातील वैज्ञानिक समुदायासमोर गेल्या काही महिन्यांपासून विकासाचे महत्त्वपूर्ण आव्हान उभे राहिले आहे निदान चाचण्या साठी Covid-19 साथीच्या रोगाचे प्रभावीपणे व्यवस्थापन आणि नियंत्रण करण्यासाठी रुग्ण आणि संशयित व्यक्तींची तपासणी करण्यासाठी रोग शोधणे.

COVID-19 शोधण्यासाठी वापरल्या जाणार्‍या सध्याच्या पद्धती आणि पद्धतींचे मूल्यमापन करण्यापूर्वी, COVID-19 कशामुळे होतो आणि या आजारासाठी रुग्णांची तपासणी करण्यासाठी निदान चाचण्या कशा विकसित केल्या जातात हे आपण प्रथम समजून घेऊ. कोविड-19 हा आजार सकारात्मकरित्या अडकलेल्या आरएनएमुळे होतो व्हायरस ते झुनोटिक आहेत, ज्याचा अर्थ ते प्राण्यांपासून मानवापर्यंत प्रजातींचे अडथळे पार करू शकतात आणि मानवांमध्ये, सामान्य सर्दीपासून ते MERS आणि SARS सारख्या गंभीर आजारांपर्यंतचे आजार होऊ शकतात. कोविड-१९ ला कारणीभूत असलेल्या विषाणूला आता इंटरनॅशनल कमिटी ऑफ टॅक्सोनॉमी ऑफ व्हायरस (ICTV) ने SARS-CoV-19 असे नाव दिले आहे, कारण तो SARS उद्रेक (SARS-CoVs) सारखाच आहे. COVID-2 रोगाची निदान चाचणी अनेक प्रकारे विकसित केली जाऊ शकते.

SARS-CoV-2 विषाणू स्वतःच शोधू शकणारी निदान चाचणी विकसित करणे ही जगभरात सर्वात लोकप्रिय आणि सध्या अवलंबलेली पद्धत आहे. या चाचणी आरटी-रिअल टाइम पीसीआर (रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस-रिअल टाइम पॉलिमरेझ चेन रिअॅक्शन) द्वारे रुग्णाच्या नमुन्यातील विषाणूजन्य जीनोम शोधण्यावर आधारित आहे. यामध्ये रिव्हर्स ट्रान्सक्रिप्टेस नावाच्या एन्झाईमचा वापर करून व्हायरल RNA चे DNA मध्ये रूपांतर करणे आणि नंतर विशिष्ट प्राइमर्स आणि फ्लोरोसेंट प्रोबचा वापर करून DNA वाढवणे, जे व्हायरल DNA वर विशिष्ट प्रदेशाशी जोडलेले असते, Taq पॉलिमरेझ वापरून आणि फ्लोरोसेंट सिग्नल शोधते. या चाचण्यांना NAATs (न्यूक्लिक अॅसिड अॅम्प्लिफिकेशन टेस्ट) असे संबोधले जाते. हे तंत्र रुग्णाच्या नमुन्यात न्यूक्लिक अॅसिडची उपस्थिती अगदी लवकर शोधण्यासाठी अतिशय उपयुक्त ठरू शकते, अगदी लक्षणे नसलेल्या रुग्णांमध्ये ज्यांना COVID-19 रोगाची लक्षणे दिसत नाहीत (विशेषतः 14-28 दिवसांच्या उष्मायन कालावधीत) आणि नंतरच्या भागात. तसेच जेव्हा रोग पूर्ण वाढलेला असतो.

CDC (सेंटर फॉर डिसीज कंट्रोल), अटलांटा, यूएसए आणि WHO मार्गदर्शक तत्त्वांवर आधारित SARS-CoV-2 चा शोध घेण्यासाठी NAAT आधारित निदान चाचणी विकसित करण्यासाठी गेल्या काही महिन्यांपासून जगभरातील विविध कंपन्या काळाच्या विरोधात काम करत आहेत. 1, 2). जगभरातील आरोग्य अधिकारी SARS-CoV-2 चा शोध घेण्यासाठी आपत्कालीन वापरासाठी या चाचण्यांना मान्यता देत आहेत. आतापर्यंत लक्ष्यित केलेल्या विषाणूजन्य जनुकांमध्ये योग्य सकारात्मक आणि नकारात्मक नियंत्रणांसह N, E, S आणि RdRP जनुकांचा समावेश आहे. अशा चाचणीसाठी गोळा केले जाणारे रुग्णाचे नमुने अप्पर रेस्पीरेटरी ट्रॅक्ट (नॅसोफॅरिंजियल आणि ऑरोफॅरिंजियल स्वॅब) आणि/किंवा खालच्या श्वसनमार्गाचे (थुंकी आणि/किंवा एंडोट्रॅचियल ऍस्पिरेट किंवा ब्रॉन्कोआल्व्होलर लॅव्हेज) आहेत. तथापि, स्टूल आणि रक्तासह इतर नमुन्यांमध्ये व्हायरस शोधणे देखील शक्य आहे. कोविड-1 साठी संशयित प्रकरणाची व्याख्या पूर्ण करणार्‍या रूग्णांकडून, सर्व आवश्यक सावधगिरी बाळगून आणि जैवसुरक्षा पद्धतींचे पालन करून (WHO[19]) च्या मार्गदर्शक तत्त्वांचे पालन करून नमुने जलदगतीने गोळा करणे आवश्यक आहे. नमुन्याची अखंडता सुनिश्चित करण्यासाठी निदान केंद्रात नेणे आणि नंतर प्रक्रिया (BSL-2 किंवा समतुल्य सुविधेमध्ये बायोसेफ्टी कॅबिनेटमध्ये RNA काढणे) त्वरीत करणे आवश्यक असल्यास ठीक आहे. उत्तम क्लिनिकल व्यवस्थापन आणि उद्रेक नियंत्रणासाठी हे सर्व प्राधान्याने केले पाहिजे.

जगभरातील प्रमुख निदान कंपन्यांनी विकसित केलेल्या विविध उपलब्ध NAAT आधारित चाचण्यांसाठी शोधण्याची वेळ 45 मिनिटांपासून 3.5 तासांपर्यंत बदलते. या चाचण्यांचे पॉइंट ऑफ केअर चाचण्यांमध्ये रूपांतर करण्यासाठी आणि निकालाच्या अचूकतेशी तडजोड न करता शक्य तितक्या कमी वेळेत इच्छित परिणाम साध्य करण्यासाठी, एका दिवसात केल्या जाणाऱ्या चाचण्यांची संख्या वाढवण्यासाठी विविध सुधारणा केल्या जात आहेत.

इतर निदान चाचणी पर्याय आहेत जलद निदान चाचण्या (RDTs) जे एकतर SARS-CoV-2 विषाणू कणांच्या पृष्ठभागावर व्यक्त केलेले विषाणूजन्य प्रतिजन/प्रथिने शोधतात कारण ते यजमान पेशींमध्ये प्रतिकृती बनवतात आणि संसर्गास प्रतिसाद म्हणून रोग किंवा होस्ट अँटीबॉडीज निर्माण करतात; या चाचणीमुळे कोविड-19 (3) ची लागण झाली आहे असे मानणाऱ्या लोकांच्या रक्तात प्रतिपिंडांची उपस्थिती आढळते.

विषाणूजन्य प्रतिजन शोधण्यासाठी RDT ची अचूकता आणि पुनरुत्पादकता अनेक घटकांवर अवलंबून असते ज्यात आजार सुरू झाल्यापासूनचा वेळ, नमुन्यातील विषाणूचे प्रमाण, नमुन्याची गुणवत्ता आणि प्रक्रिया आणि चाचणी किटमध्ये उपस्थित अभिकर्मक तयार करणे समाविष्ट आहे. या चलांमुळे, या चाचण्यांची संवेदनशीलता 34% ते 80% पर्यंत बदलू शकते. या पर्यायाचा एक मोठा दोष म्हणजे विषाणूची प्रथिने शोधण्यासाठी व्हायरस त्याच्या प्रतिकृती आणि संसर्गजन्य अवस्थेत असणे आवश्यक आहे.

त्याचप्रमाणे, यजमान ऍन्टीबॉडीज शोधणार्‍या चाचण्या ऍन्टीबॉडीच्या प्रतिसादाच्या सामर्थ्यावर आधारित असतात जे वय, पौष्टिक स्थिती, रोगाची तीव्रता आणि रोगप्रतिकारक शक्ती दडपणाऱ्या काही औषधे किंवा संक्रमण यासारख्या घटकांवर अवलंबून असतात. या पर्यायाचा एक मोठा दोष असा आहे की SARS-CoV-2 विषाणूचा संसर्ग झाल्यानंतर काही दिवसांपासून ते आठवड्यांपर्यंत अँटीबॉडीज तयार होतात आणि चाचणी करण्यासाठी इतका वेळ प्रतीक्षा करावी लागते. याचा अर्थ असा की यजमान अँटीबॉडी प्रतिसादावर आधारित कोविड-19 संसर्गाचे निदान अनेकदा केवळ पुनर्प्राप्ती टप्प्यातच शक्य होईल, जेव्हा क्लिनिकल हस्तक्षेप किंवा रोगाचा प्रसार रोखण्याच्या अनेक संधी आधीच निघून गेल्या असतील.

सध्या, वर नमूद केलेले RDTs केवळ संशोधन सेटिंगमध्ये मंजूर केले गेले आहेत आणि डेटाच्या अभावामुळे क्लिनिकल निदानासाठी नाही (3, 4). जसजसे कोविड-19 साठी अधिकाधिक महामारीविषयक डेटा उपलब्ध होत जाईल, तसतसे अधिक RDTs विकसित केले जातील आणि क्लिनिकल सेटिंगमध्ये काळजी चाचण्या म्हणून मंजूर केले जातील कारण ते सरासरी NAAT आधारित चाचण्यांच्या तुलनेत 10-30 मिनिटांत निकाल देऊ शकतात. रोग शोधण्यासाठी काही तास.

***

संदर्भ:
1. WHO, 2020. कोविड-19 साठी प्रयोगशाळा चाचणी धोरण शिफारशी. अंतरिम मार्गदर्शन. 21 मार्च 2020. येथे ऑनलाइन उपलब्ध https://apps.who.int/iris/bitstream/handle/10665/331509/WHO-COVID-19-lab_testing-2020.1-eng.pdf 09 एप्रिल 2020 रोजी प्रवेश केला
2. CDC 2020. प्रयोगशाळांसाठी माहिती. प्रयोगशाळांसाठी अंतरिम मार्गदर्शन येथे ऑनलाइन उपलब्ध आहे https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-nCoV/lab/index.html 09 एप्रिल 2020 रोजी प्रवेश केला.
3. WHO, 2020. पॉइंट ऑफ केअर चाचण्यांच्या वापराबाबत सल्ला. वैज्ञानिक संक्षिप्त. 08 एप्रिल 2020. येथे ऑनलाइन उपलब्ध https://www.who.int/news-room/commentaries/detail/advice-on-the-use-of-point-of-care-immunodiagnostic-tests-for-covid-19 09 एप्रिल 2020 रोजी प्रवेश केला.
4. ECDC, 2020. EU/EEA मध्ये कोविड-19 निदानासाठी जलद चाचणी स्थितीचे विहंगावलोकन. 01 एप्रिल 2020. रोग प्रतिबंध आणि नियंत्रणासाठी युरोपियन केंद्र. येथे ऑनलाइन उपलब्ध आहे https://www.ecdc.europa.eu/en/publications-data/overview-rapid-test-situation-covid-19-diagnosis-eueea 09 एप्रिल 2020 रोजी प्रवेश केला

***